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技術(shù)文章

電泳儀作原理分類

電泳儀作原理分類

 

作原理

在溶液中能吸附帶電質(zhì)點(diǎn)或本身帶有可解離基團(tuán)的物質(zhì)顆粒,如蛋白質(zhì)、氨基酸等,在定的pH值條件下,于直流電場(chǎng)中然會(huì)受到電性相反的電吸引而發(fā)生移動(dòng)。不同物質(zhì)的顆粒在電場(chǎng)中的移動(dòng)速度除與其帶電狀態(tài)和電場(chǎng)強(qiáng)度有關(guān)外,還與顆粒的大小、形狀和介質(zhì)黏度有關(guān)。根據(jù)這特征,應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)行定性或定量分析,或?qū)⒍ɑ旌衔镄薪M分分析或單個(gè)組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理*制的。

電泳的影響因素很多,主要有被分離物質(zhì)的帶電荷量多少、電場(chǎng)強(qiáng)度、緩沖液的pH值和離子強(qiáng)度及支持介質(zhì)的化學(xué)惰性

分類

根據(jù)電泳中是否使用支持介質(zhì)分為自由電泳和區(qū)帶電泳。

自由電泳不使用支持介質(zhì),電泳在溶液中行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細(xì)胞)通電后移動(dòng),不出現(xiàn)界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質(zhì)集中在某層,形成各自的界面而行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴*的電流儀器,僅在少數(shù)*電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。

區(qū)帶電泳都使用支持介質(zhì),根據(jù)支持介質(zhì)不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據(jù)支持介質(zhì)的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細(xì)管電脈、橋形電泳和連續(xù)流動(dòng)電泳等。

常見(jiàn)的幾種電泳儀有:

1. 自動(dòng)熒光/可見(jiàn)光雙系統(tǒng)電泳儀

具有熒光/可見(jiàn)光雙系統(tǒng),使用熒光試劑項(xiàng)目如CKLD同酶。優(yōu)點(diǎn)靈敏度、準(zhǔn)確度且采用壓、低溫系統(tǒng),速度非常快。

2. 自動(dòng)醋纖膜電泳儀

為可見(jiàn)光單系統(tǒng),使用醋纖膜電泳片,優(yōu)點(diǎn)為自動(dòng)化程度更。多用于臨床常規(guī)血清蛋白電泳分析。

3. 自動(dòng)瓊脂糖電泳儀

為可見(jiàn)光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優(yōu)點(diǎn)為靈敏度,可用于低濃度蛋白檢驗(yàn),如尿蛋白及腦脊液蛋白,同酶的分離效果也相當(dāng)不錯(cuò),所能做項(xiàng)目較多且靈敏度較。

4. 自動(dòng)電泳分析系統(tǒng)

該電泳儀集中了上述儀器的優(yōu)點(diǎn),自動(dòng)點(diǎn)樣、電泳、呈色(或染色、脫色)、烘干。可用各種電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見(jiàn)光及熒光呈色雙系統(tǒng),是種較理想的電泳儀。

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